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La soluzione Trypsin-EDTA prodotta da Solebar contiene 0,25% di pansiima e 0,02% di EDTA (0,53 mM) in una soluzione salina equilibrata senza calcio e magnesio, sterilizzata e può essere utilizzata direttamente per coltivare la digestione di cellule e tessuti. Questo prodotto ha le caratteristiche di comodità, rapidità, stabilità e sicurezza, buono stato delle cellule.
Descrizione del prodotto:
Nelle colture in vitro di cellule di tessuto e nella dispersione di cellule di tessuto in colture di cellule primitive (preparazione di blocchi di tessuto in una singola sospensione cellulare) e nelle colture di cellule di trasmissione, la dispersione digestiva delle cellule di crescita a parete aderente deve utilizzare liquido digestivo di cellule di tessuto. Il fluido digestivo comunemente utilizzato è la panproteinasi, EDTA, ecc., La sua funzione è principalmente quella di idrolizzare le proteine intercellulari (come la matrice extracellulare) per far spargere il tessuto o le cellule adesive in singole cellule e creare una sospensione cellulare per ulteriori esperimenti.
Conservazione: -20 ° C, validità 12 mesi.
Uso:
1. Digestione delle cellule:
a) Aspirare la coltura e lavare le cellule una volta con PBS sterile, Hanks o una coltura senza siero per rimuovere il siero residuo.
b) Aggiungere una piccola quantità di liquido digestivo panproteinasi, coprire le cellule, lasciare a temperatura ambiente per 1-2 minuti. Il tempo di digestione delle diverse cellule è diverso, e per le cellule con pareti salde il tempo di digestione può essere adeguatamente prolungato.
c) Osservato al microscopio, le cellule si contraggono visibilmente e l'osservazione a occhio nudo del fondo del vaso di coltura mostra un cambiamento significativo della morfologia delle cellule; Oppure colpire le cellule con una pistola per scoprire che le cellule possono essere abbattute. In questo momento assorbire il liquido digestivo. Aggiungere una coltura cellulare contenente siero e soffiare le cellule, che possono essere utilizzate direttamente per esperimenti successivi.
d) Se si riscontra una digestione insufficiente, può essere aggiunto liquido digestivo panproteinasi per digerire nuovamente.
e) Se si scopre che il tempo di digestione delle cellule è troppo lungo, non è sufficiente per soffiare le cellule, le cellule sono già in parte cadute direttamente dal fondo del vaso di coltura, direttamente con il liquido di coltura delle cellule panenzimatiche per soffiare tutte le cellule. 1000-2000g centrifugare per 1 minuto, precipitare le cellule, cercare di rimuovere il liquido digestivo delle cellule panenzimatiche, aggiungere il siero contenente una coltura completa per risolvere le cellule, che possono essere utilizzate per esperimenti successivi.
Digestione delle organizzazioni:
Il tempo necessario per digerire i diversi tessuti varia notevolmente e di solito è opportuno che il tessuto possa essere abbastanza dissolto dopo la digestione.
Attenzioni:
A causa delle differenze nelle proprietà dei tessuti o delle cellule, gli sperimentatori dovrebbero determinare il tempo di digestione ottimale in base a circostanze specifiche; Il tempo di digestione delle cellule non dovrebbe essere troppo lungo, altrimenti influenzerà l'adesione cellulare e lo stato di crescita;
2. Questo prodotto non contiene agenti antibatterici. Durante l'uso, particolare attenzione deve essere prestata all'operazione asettica per evitare la contaminazione dei liquidi digestivi da microrganismi;
3. Non è consigliabile conservare a 4 ℃ per lungo tempo, e il congelamento ripetuto e lo scongelamento dovrebbero essere evitati. Quando usato in piccole quantità, si consiglia di imballare e conservare separatamente;
Per la vostra sicurezza e salute, si prega di indossare indumenti da laboratorio e guanti monouso durante l'operazione.