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DMEM è uno dei mezzi di cultura più comuni nelle colture cellulari di oggi, il mezzo di cultura dmem è stato sviluppato sulla base del mezzo di cultura MEM, confrontato con il mezzo di cultura MEM, il mezzo di cultura DMEM ha aumentato l'uso di vari componenti del mezzo di cultura MEM, qui sotto si descrive principalmente il metodo di preparazione di DMEM.

1 Preparare acqua fresca a tre vapori o acqua ultrapura Millipore.

2 pesare la quantità desiderata di mezzo di polvere secca, aggiungere circa la metà del volume finale in tre acque a vapore; Se si prepara un imballaggio di coltura, dopo aver versato l'intera polvere secca dell'imballaggio in tre acque a vapore, è necessario lavare il sacchetto con acqua 2 volte e versare nel liquido di coltura per garantire che tutta la polvere secca sia sciolta in un liquido di coltura. L'agitazione magnetica o l'agitazione artificiale lo scioglie completamente.

3 aggiungere la quantità necessaria di idrocarbonato di sodio in base ai requisiti sul sacchetto; In base alle esigenze sperimentali, aggiungere HEPES (5-20 mmol / L), glutamina e altre sostanze speciali.

4 Aggiungere acqua al volume finale.

Se necessario, regolare il pH con 1 mol/L di acido clorico e 1 mol/L di idrossido di sodio.

6 sterilizzazione con un filtro sterile 0.22um, suddiviso in una bottiglia di siero sterile, conservato in frigorifero a 4 ℃.

Aggiungere penicillina 100U / mL e catenamicina 100U / mL prima di usare il liquido di coltura preparato, e aggiungere il siero (5% -20%) se necessario. Il mezzo DMEM è ampiamente utilizzato. Basato su un contenuto ricco di amminoacidi e microbi in un mezzo DMEM, e con acido acetonico in glicosilisi e trace di ioni Fe, è quindi l'applicazione più comune in colture cellulari, produzione di vaccini, ecc.